400-900-4166
2021-09-09
第一步:取适量组织样本剪碎,加冷PBS,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体(或用液氮研磨),冰上静置5分钟,小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。
第二步:在4℃,500×g条件下离心2-3分钟,弃上清。
第三步:每20ul细胞压积中加入200μl冷的Buffer A,2ul蛋白酶抑制剂混合物,高速涡旋振荡15秒,置冰上10分钟。
第四步:再次高速涡旋振荡5秒,然后在4℃,16000×g条件下离心5分钟。
第五步:快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到胞浆蛋白,请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。
第六步:在沉淀中加入200μl冷的Buffer B,2ul蛋白酶抑制剂混合物,高速涡旋振荡15秒。
第七步:置冰上40分钟,每隔10分钟高速涡旋振荡15秒。
第八步:在4℃,16000×g条件下离心10分钟。
第九步:快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到核蛋白。
蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。
吉至试剂核蛋白提取试剂盒操作简单、方便,从培养细胞或新鲜组织中提核蛋白、整个过程只需60分钟即可将核蛋白和浆蛋白从细胞中分离出来。

组织蛋白酶D

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