蛋白浓度测定试剂盒应该怎么挑选?
2024-10-25
蛋白浓度测定通常采用比色法
其原理是:基于蛋白质与特定试剂发生化学反应后产生颜色变化,通过测定溶液在特定波长下的吸光度,进而计算蛋白浓度。
常见的如考马斯亮蓝法(Bradford 法)和 Lowry 法。
考马斯亮蓝法 Bradford 法:
考马斯亮蓝G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置(Imax),由465nm变为595nm,在一定的浓度范围内,测定的吸光度值A595与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响,样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM,但受略高浓度的去垢剂影响,需确保SDS的浓度低于0.1%,Triton X-100低于0.1%,Tween 20, 60, 80低于0.06%。含去垢剂的样品推荐使用吉至生化生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(AC13858)。
Lowry 法:
Lowry法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将Folin试剂还原,产生深蓝色,颜色深浅与蛋白质含量成正比。定量范围为5~100μg/ml蛋白质。Folin试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外,不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。Lowry法测定较为不受脂类物质干扰,适于脂类含量较高的样品测定。也能耐受相当浓度的去垢剂如SDS。
Bradford法蛋白浓度测定试剂盒,BRBradford Protein Assay Kit
(订货以英文名为准)
产品编号:AC13856 品牌:Acmec
保存条件:2-8°C
有效期:12个月
英文名称:Bradford Protein Assay Kit
储存条件:BSA附件-20℃,其它试剂2-8℃
单位:盒
规格:2500T
Lowry法蛋白浓度测定试剂盒-1000微孔,BR
Lowry Protein Assay Kit
(订货以英文名为准)
产品编号:AC13861 品牌:Acmec
保存条件:见说明书
英文名称:Lowry Protein Assay Kit
储存条件:BSA附件-20℃,其它试剂RT,有效期1年
单位:盒
规格:1000T