全蛋白提取试剂盒(强),BR

产品属性 Product Attributes

基本信息

英文名称： Total Protein Extraction Maxi Kit
中文名称： 全蛋白提取试剂盒（强）
规格： 50T ; 100T
储存条件： 保存在-20℃，避光，1年。
运输条件： 冷冻运输

产品介绍 Product Introduction

全蛋白提取试剂盒（强）用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，作用较为强烈，可快速获得总蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验，由于含有上述的酶抑制剂，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品仅用于科研。

产品组成:

试剂名称                         规格           储存条件

裂解液（强）                   100mL          2-8℃

磷酸酶抑制剂（100×）      1mL            -20℃

蛋白酶抑制剂（100×）      1mL            -20℃

PMSF（100×）               1mL           -20℃

操作方法:

1、组织总蛋白的提取

在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF；混匀，放置在冰上备用；

称取0.1g的新鲜组织，放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处，用眼科剪将组织块尽可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直至没有明显的组织块，这个过程注意冰上操作；

将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中，4℃ 12000g离心30min；

吸取上清至新的管中；

进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。

（提取好的蛋白建议保存于-80℃，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。)

2、细胞总蛋白的提取

裂解液的用量：10⁷个细胞需要裂解液1ml；

贴壁细胞：弃去培养基，用冷的PBS洗两次，弃去PBS，然后加入计算好的细胞裂解液；在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞，将刮离的细胞裂解液移入EP管中，颠倒裂解20-30min

悬浮细胞：4℃ 400g离心收集细胞，用冷的PBS洗两次细胞，同样按细胞数加入裂解液，涡旋10s，放置冰上裂解10min，重复3-4次；

裂解完毕之后，将细胞裂解液4℃ 12000g离心30min；

将上清移入新的EP管中；

进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。

（提取好的蛋白建议保存于-80℃，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。)

注意事项：

1. 实验过程，所有试剂都要需要预冷或者即融，保证操作过程中的低温环境；

2. PMSF毒性低于DFP，需现用现加，因为PMSF在水溶液中会快速降解。

注意事项 Considerations

1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。